在制药行业，无菌玻璃瓶作为注射剂、生物制剂等关键药品的常用包装形式，其密封完整性是保障药品无菌状态和稳定性的首要防线。密封失效意味着药品可能被微生物污染或发生理化性质改变，直接关乎患者的用药安全。因此，依据科学原理对无菌玻璃瓶进行系统的密封性测试，是制药企业质量控制体系中不*或缺的强制性环节。
目前，行业内广泛采用并得到各国药典及ISO标准认可的密封性测试方法，主要基于“内外压差”原理，通过制造压差并观察介质泄漏来判定密封性能。具体可分为两种经典方法：
1. 真空法（水中法）
这是一种直观且应用历史悠久的定性测试方法。
原理：将注有一定液体的待测玻璃瓶浸没于密封测试仪的透明真空室水中。随后对真空室抽真空，使瓶外环境压力（P外）显著低于瓶内压力（P内），形成ΔP = P内 - P外的压差。
泄漏判定：若瓶口（胶塞/铝盖组合）存在泄漏，在压差驱动下，瓶内气体会通过泄漏通道逸出，在水中形成连续稳定的气泡流。观察者即可直观定位泄漏点。标准通常规定，单个、孤立的气泡不视为有效泄漏，这可能是瓶身或夹具表面附着的气体释放所致。
2. 色水法（亚甲基蓝法）
这是一种更为严苛、用于检测微量泄漏的定性方法，尤其适用于无菌玻璃瓶。
原理：测试前，在瓶内注入适量的含亚甲基蓝等示踪染料的溶液。将瓶子倒置或侧置于真空室内（通常不浸入水中），对真空室抽真空并保压一段时间。随后释放真空，恢复常压。
泄漏判定：在压差作用下，外部空气会试图通过任何可能的泄漏点进入瓶内。保压结束后，通过外部观察或打开包装检查，若发现有色溶液渗入瓶口密封界面，或在内壁发现染料痕迹，则判定为密封不合格。此方法灵敏度高，能发现更细微的泄漏。
为确保测试结果的可靠性与重现性，必须遵循标准化的操作流程，并严格控制关键参数。一次完整的测试通常包含以下步骤，不同测试方法的核心区别如下表所示：
| 关键步骤 | 真空法（水中法） | 色水法（亚甲基蓝法） |
|---|---|---|
| 试样准备 | 瓶内注入1/3至2/3公称容量的清水或指定溶液。 | 瓶内注入规定体积的含亚甲基蓝染料溶液。 |
| 测试设置 | 样品浸没于真空室清水中，使用夹具固定防止上浮。 | 样品通常倒置或侧放于真空室架子上，确保瓶口密封区域暴露。 |
| 参数施加 | 根据标准（如GB/T 15171）或产品标准设定真空度和保压时间。 | 设定特定的真空度、保压时间及可能的恢复时间。 |
| 结果观察/判定 | 在保压期间观察有无连续气泡产生。 | 保压恢复后，观察瓶口外部有无液体渗入或内部有无染料污染。 |
无论采用哪种方法，以下因素对测试准确性至关重要：
设备精度：真空系统的稳定性、真空表的精度（通常要求不低于1.5级）和计时准确性是基础。
参数设定：测试真空度的选择需平衡“检出泄漏”和“避免非破坏性包装变形”两方面，应依据产品特性和标准严格设定。过高的压力可能导致合格品被误判。
样品状态：测试前，样品应在规定的温湿度环境下进行状态调节，以消除环境波动的影响。
基于上述原理的密封性测试仪应用范围远超无菌玻璃瓶，覆盖了整个药品和医*器械包装领域：
泡罩包装：检测铝箔与PVC/PVDC硬片之间的热封强度，以及是否存在微小针孔。
软包装袋：用于食品、药品的预制袋或自立袋，检测热封边及包装整体的密封性。
药用塑料瓶：适用于口服固体、液体药用塑料瓶，尤其是需要检测瓶盖扭力密封性能的场合。
其他无菌屏障系统：如预灌封注射器、滴眼剂瓶、血液袋等，确保其在整个货架期内的完整性。
1. 问：为什么有时水中法测试看到几个气泡后就不再产生，这算合格吗？
答： 这通常不算有效泄漏。标准中定义的泄漏是指连续、持续的气泡流。初始的几个气泡很可能是样品表面或夹具凹陷处附着的气体在真空环境下被释放，当这些游离气体排尽后，气泡停止。这种情况不应判定为包装泄漏。
2. 问：对于不同规格（大小、材质）的无菌玻璃瓶，测试参数需要调整吗？
答： 是的，测试参数（主要是真空度和保压时间）应根据包装的尺寸、材质强度以及产品的质量标准进行设定。例如，对于刚性较好的小容量玻璃瓶，可能适用较高的测试真空度；而对于大容量或某些特殊材质的容器，则需要更温和的条件以防包装变形。所有参数设定都应有明确的标准依据或经过充分的方法学验证。
3. 问：密封性测试与微生物挑战试验是什么关系？
答： 两者是互补关系，但目的和阶段不同。密封性测试（物理测试）是一种过程控制和放行检验手段，用于快速、非破坏性地检测是否存在物理泄漏通道。微生物挑战试验是一种验证性测试，用于在包装开发阶段或工艺变更时，验证在*条件下，整个包装系统能否阻止微生物侵入。前者用于日常批检，后者用于前期验证。
4. 问：生产线上的在线泄漏检测和实验室的密封性测试有何区别？
答： 主要区别在于检测原理、速度和目的。在线检测（如高压放电法、真空衰减快检法）追求高速（每秒多个） 和自动化，用于100%在线剔除明显不合格品，但其精度和灵敏度可能受限。实验室密封性测试则严格按照药典或国家标准操作，精度更高、方法更全面，用于离线抽检、型式检验、方法验证及争议仲裁，是确保质量标准的核心环节。
本文件旨在阐述无菌玻璃瓶密封性测试的通用技术原理与方法，内容基于行业公开标准及实践总结，仅供参考。具体的测试方法建立、参数设定与合格标准判定，必须严格遵循 《中国药典》、GB/T 15171、ISO 8362 等相关法规及质量标准的新版要求，并结合具体产品特性进行验证。
